週次 |
日期 |
單元主題 |
第1週 |
3/07 |
桿狀病毒基因工程課程介紹 |
第2週 |
3/14 |
主要會感染人類的人畜相關動物病毒介紹 |
第3週 |
3/21 |
桿狀病毒及基因工程1 |
第4週 |
3/28 |
桿狀病毒及基因工程2 |
第5週 |
4/04 |
目標基因轉殖:質體DNA限制酶切割、DNA片段電泳及回收 |
第6週 |
4/11 |
目標基因轉殖:試測DNA回收量、結合反應、轉型作用 |
第7週 |
4/18 |
目標基因挑選:
利用 Colony PCR 進行確認正確的目標基因,質體DNA的純化 |
第8週 |
4/25 |
製作基因工程桿狀病毒:觀察預先做好的重組病毒的螢光,以共轉染製作重組病毒 |
第9週 |
5/02 |
製作基因工程桿狀病毒:利用end-point dilution cloning 純化重組病毒 |
第10週 |
5/09 |
基因工程病毒純化:
觀察並計量上週共轉染的重組病毒的螢光 |
第11週 |
5/16 |
基因工程病毒純化:
標記end-point dilution中病毒感染的細胞位置,挑出純化之重組病毒於T25 flask中放大。 |
第12週 |
5/23 |
病毒力價測定1:
- 10倍稀釋病毒以測定桿狀病毒的力價
- 測定桿狀病毒的力價 (Q-PCR, one of the 24-well) |
第13週 |
5/30 |
病毒力價測定2:
- 使用螢光顯微鏡觀察並記錄結果(TCID50)
- 比較TCID50 和Q-PCR之差異
- 感染細胞生產融合蛋白,準備下星期做SDS-PAGE分析產量 |
第14週 |
6/06 |
基因工程蛋白測定:
-以SDS-PAGE分析產出的蛋白質 |
第15週 |
6/13 |
期末報告,做成幻燈片討論 |