課程資訊
課程名稱
病毒基因工程學與實驗
Viral Genetic Engineering and Experiment 
開課學期
109-2 
授課對象
生物資源暨農學院  植物病理與微生物學研究所  
授課教師
趙裕展 
課號
PPM5078 
課程識別碼
633 U1450 
班次
 
學分
2.0 
全/半年
半年 
必/選修
選修 
上課時間
星期六3,4(10:20~12:10) 
上課地點
 
備註
星期六上課,上課地點一號館321、中研院分生所
總人數上限:8人 
Ceiba 課程網頁
http://ceiba.ntu.edu.tw/1092PPM5078_ 
課程簡介影片
 
核心能力關聯
本課程尚未建立核心能力關連
課程大綱
為確保您我的權利,請尊重智慧財產權及不得非法影印
課程概述

本課程包括課程說明、上課、討論課及實驗課。主要為讓同學瞭解整個病毒基因工程的背景後親手從事實驗,練習如何用昆蟲桿狀病毒生產基因工程蛋白。昆蟲桿狀病毒對人無害,為目前所知非常好的蛋白基因工程工具,可以生產品質極佳的動物及人類疫苗,具有產業價值。此病毒也可為組織工程及哺乳類細胞的基因轉殖工具,幫學術研究機構進行研究,是一個很有價值,對同學們未來的發展很有助益的課程。 

課程目標
本課程開授之主要目的在教導如何以基因工程的方法操控有用病毒,以生產對人類有益的產品。內容包括講授病毒基因工程的原理與方法,讓同學們能在知識面了解如何操控病毒。本課程更重視實務操作與經驗,提供充分的材料,全程並有助理協助,使同學們能掌握整個學習過程以及實際操作進度,而有實質的收穫。本課程將以植物保護之重要病毒,昆蟲桿狀病毒,為主要內容及材料來進行教學及實驗操作。基因工程操控桿狀病毒可以生產大量且高品質的蛋白質,而為醫、農、工業使用,如製造疫苗、飼料添加物、實驗室蛋白等等,對同學之知識面及將來研究或就業之實務面幫忙甚大。 
課程要求
2 學分 大學及研究所同學選修課程
一、雙向教學:教授主要課程後,學生蒐集資料,並報告如何創新病毒平台系統。
二、在整學期中實際動手做出一個基因工程病毒以生產蛋白。
三、訓練學生在學期末做出一個完整的論文,並上台演練做報告。 
預期每週課後學習時數
 
Office Hours
另約時間 備註: 每堂課後可討論,或另約時間 
指定閱讀
待補 
參考書目
桿狀病毒基因工程構築手冊 
評量方式
(僅供參考)
 
No.
項目
百分比
說明
1. 
實驗報告 
40% 
期末交實驗結果並進行口頭報告 
2. 
每段落實驗結果 
40% 
每堂課實驗結果 
3. 
出缺席狀況 
20% 
有事可請假,請事先告知。 
 
課程進度
週次
日期
單元主題
第1週
3/07  桿狀病毒基因工程課程介紹 
第2週
3/14  主要會感染人類的人畜相關動物病毒介紹 
第3週
3/21  桿狀病毒及基因工程1 
第4週
3/28  桿狀病毒及基因工程2 
第5週
4/04  目標基因轉殖:質體DNA限制酶切割、DNA片段電泳及回收 
第6週
4/11  目標基因轉殖:試測DNA回收量、結合反應、轉型作用 
第7週
4/18  目標基因挑選:
利用 Colony PCR 進行確認正確的目標基因,質體DNA的純化 
第8週
4/25  製作基因工程桿狀病毒:觀察預先做好的重組病毒的螢光,以共轉染製作重組病毒 
第9週
5/02  製作基因工程桿狀病毒:利用end-point dilution cloning 純化重組病毒 
第10週
5/09  基因工程病毒純化:
觀察並計量上週共轉染的重組病毒的螢光 
第11週
5/16  基因工程病毒純化:
標記end-point dilution中病毒感染的細胞位置,挑出純化之重組病毒於T25 flask中放大。 
第12週
5/23  病毒力價測定1:
- 10倍稀釋病毒以測定桿狀病毒的力價
- 測定桿狀病毒的力價 (Q-PCR, one of the 24-well) 
第13週
5/30  病毒力價測定2:
- 使用螢光顯微鏡觀察並記錄結果(TCID50)
- 比較TCID50 和Q-PCR之差異
- 感染細胞生產融合蛋白,準備下星期做SDS-PAGE分析產量 
第14週
6/06  基因工程蛋白測定:
-以SDS-PAGE分析產出的蛋白質 
第15週
6/13  期末報告,做成幻燈片討論